Histopathological and immunohistochemical study of antiosteoporotic efficacy of the earthworm Allolobophora caliginosa extract in orchiectomized rats / Estudio histopatológico e inmunohistoquímico de la eficacia antiosteoporótica del extracto de lombriz de tierra Allolobophora caliginosa en ratas orquiectomizadas

SUMMARY: Osteoporosis is a bone condition marked by a loss of bone mass and a disruption of bone microarchitecture. Men lose bone density as they age, resulting in brittle bones. The loss of free testosterone is one of the key factors. The objective of present study was to evaluate Allolobophora caliginosa extract (AcE) for its anti-osteoporotic and antiapoptotic activity in orchiotomized rat model at two different dose levels. Twenty eight male rats were divided into two groups. The first group represented sham operated rats while the second group underwent bilateral orchidectomy (OCX). After one week of recovery from orchidectomy surgery, the second group was randomly subdivided into 3 subgroups. The first OCX subgroup was administered orally distilled water daily for 10 weeks. The other two OCX subgroups were administered AcE (100 or200 mg/kg body weight/day) orally for 10 weeks. Orchiectomy induces remarkable loss of the cortical as well as trabecular bone loss; which, could be counterbalanced by Allolobophora caliginosa extract (AcE) that prevented cortical as well as trabecular bone loss. Allolobophora caliginosa extract (AcE) at Dose 200 mg/kg/day was found to be effective at a highly significant level in osteoporotic bone, as determined by histological images and immunohistochemical study, where Dose (100 mg/kg/day) was found to be moderately significant.In the present study, it is suggested that AcE may inhibit steroid-induced osteoblasts apoptosis, potentially via upregulation of Bcl-2 and downregulation of caspase-3. Allolobophora caliginosa extract demonstrates anti-apoptotic and anti-oxidant properties. Therefore, AcE may be used for the prevention of steroid-induced bone damage.

RESUMEN: La osteoporosis es una afección ósea caracterizada por una pérdida de masa ósea y una alteración de la microarquitectura ósea. Los hombres pierden densidad ósea a medida que envejecen, lo que resulta en huesos quebradizos. La pérdida de testosterona libre es factor clave en este proceso. El objetivo del presente estudio fue evaluar el extracto de Allolobophora caliginosa (AcE) debido a su actividad antiosteoporótica y antiapoptótica en un modelo de rata orquiectomizadas con dos niveles de dosis diferentes. Se dividieron veintiocho ratas macho en dos grupos. El primer grupo incluyó ratas con operación simulada, mientras que el segundo grupo se sometió a orquidectomía bilateral (OCX). Después de una semana de recuperación de la orquidectomía, el segundo grupo fue subdividido en 3 subgrupos. Al primer subgrupo de OCX se administró diariamente agua destilada por vía oral durante 10 semanas. Los otros dos subgrupos de OCX se administraron por vía oral AcE (100 o 200 mg / kg de peso corporal / día) durante 10 semanas. La orquidectomía induce una pérdida notable del hueso cortical y trabecular; el cual podría ser contrarrestado por el extracto de Allolobophora caliginosa (AcE) que previno la pérdida de hueso tanto cortical como trabecular visualizado en imágenes histológicas y estudio inmuno- histoquímico, donde se encontró que la dosis (100 mg / kg / día) era moderadamente significativa. En el presente estudio, se sugiere que la AcE puede inhibir la apoptosis de los osteoblastos inducida por esteroides, potencialmente a través de la regulación al alza de Bcl 2 y la regulación a la baja de caspasa 3. El extracto de Allolobophora caliginosa demuestra propiedades anti apoptóticas y antioxidantes. Por lo tanto, AcE puede usarse para la prevención del daño óseo inducido por esteroides.

Effect of powdered shells treatment of the snail Megalobulimus lopesi on wounds of diabetic rats

Abstract Purpose: To analyzed the healing effect of the powdered shell of the Megalobulimus lopesi snail on wounds of diabetic rats, since in non-diabetic rats the powdered shell presented healing potential. Methods: Seventy-two Wistar rats (Rattus norvegicus albinus) were divided into three groups: Control group (GC.diab), no therapeutic intervention on the wound; Vehicle's Control group, topical via, in diabetic rats (GCvt.diab): Powder Shell Group (PC) applied topically (GPCvt.diab): Experimental group was administered topically shortly after wound dressing and once a day during the experimental period (3, 7, 14 and 21 days) the composition containing the powdered shell of the snail. The following variables related to the healing potential were analyzed: macroscopic one, where the capacity of reduction of the wound area was evaluated; histological analysis in HE, angiogenic activity, morphometric analysis (re-epithelization), leukocyte inflammatory infiltrate; leukocyte count and also differentiation in peripheral blood. Results: The topical application in wounds of diabetic rats presented healing activity, accelerating wound closure, stimulating angiogenesis and being pro-inflammatory in the early and anti-inflammatory stages in the final times of the healing process. Conclusion: The topical administration of the powdered shell on wounds of diabetic patients becomes a therapeutic option of low cost, with ease in the administration and access as well.

Effect of a new remineralizing biomaterial on the color of dental enamel

El objetivo de este trabajo fue describir el efecto de la composición de una sustancia remineralizante (SRM) y de la presión osmótica sobre el color dental mediante espectrofotometría. Se tomaron 104 premolares y molares humanos repartidos aleatoriamente en 2 grupos, cada uno de 52 especímenes. El grupo 1 se trató con la sustancia remineralizante SRM 55 (agente remineralizante 1) mezcla de 50 por ciento - 50 por ciento de mineral de grano fino y otro mineral de grano grueso y el grupo 2 se trató con la sustancia remineralizante SRM 91(agente remineralizante 2) contienen los mismos minerales en proporción 90 por ciento - 10 por ciento. A su vez cada grupo se dividió en 2 subgrupos, cada uno de 26 especímenes que se almacenaron así: Un subgrupo en saliva sintética con presión osmótica isotónica (PI) y el otro con presión osmótica hipotónica (PH). Se tomaron registros iniciales y finales con el espectrofotómetro Vita Easy Shade®. Con las lecturas se calcularon losparámetros de color (L*; a*; b*) y los índices de blanqueamiento (WIC; WIO; W). Los cambios de color (ΔL; ΔA; ΔB; yΔE) y los índices de blanqueamiento se compararon y se trataron todos mediante un análisis descriptivo. Las variables ΔA, ΔL, ΔB, ΔE e índice de blanqueamiento W se trataron con ANOVA y los índices WIC y WIO con un análisis de varianza no paramétrico Kruskal Wallis. Los resultados indican que la combinación A2 (SRM 91 y PI) afectó las variables ΔB y ΔE. La combinación B1 (SRM 55 Y PH) afectó las variables ΔA, ΔB y el índice de blanqueamiento WIO. Solamente SRM 91afectó la variable ΔL. La presión osmótica de la saliva y la sustancia remineralizante afectan el color del esmalte dental...

Immune enhancement activities of silk lutein extract from Bombyx mori cocoons

BACKGROUND: Declining immune function poses an important clinical challenge worldwide and supplementation with natural products that possessing immune enhancing properties is a promising approach for preventing or delaying immune function decline. Cocoons from yellow silkworms are a significant source of lutein, and this unexplored silk extract could be a viable alternative source for dietary lutein. This study assessed immunomodulatory activities of the silk lutein extract. Female BALB/c mice orally received lutein, either as silk or marigold extracts (10 or 20 mg/kg daily), or vehicle only (1% tween 80 in PBS pH 7.4) for 4 weeks. Natural killer (NK) cell activity, specific antibody production, lymphocyte subpopulations, mitogen-induced lymphocyte proliferation, and cytokine production were examined. RESULTS: Silk lutein extract increased NK cell activity, and the effect was dose-related whereas marigold lutein extract was ineffective. Silk lutein extract dose-dependently enhanced antibody production in pre-immunized mice but marigold lutein extract had no effect. Feeding with silk lutein extract increased the populations of CD3+ and CD4 + CD3 + cells. Silk lutein extract also stimulated concanavalin A- and lipopolysaccharide-induced proliferations of T and B lymphocytes, respectively. Moreover, silk lutein extract increased IL-2 and IFN-γ production while the effect of marigold lutein extract was undetectable. CONCLUSIONS: Together, silk lutein extract enhanced both innate and adaptive immune functions. This preparation may prove to be an effective supplement for strengthened immunity.

Concentración natural de compuestos antimaláricos en artrópodos tropicales (in vitro)

Natural concentration of antimalaric components in Tropical arthropods (in vitro). Alcohol, hexane and dichlorometane extracts of 751 samples of Costa Rican arthropods were studied for the presence of antimalaric components. With Plasmodium berghei we set an in vitro model in which the effect of the extract was determined by staining of the parasites with cresil brilliant blue. Active extracts at concentration of 50 mg or less, were considered positive. Promissory extracts were found in the orders Lepidoptera (24.1%), Coleoptera (32.8%), Hemiptera (38.5%) and Polydesmida (81.3%). Since most of the Lepidoptera samples were in the immature stages, the relation with the host plant was analyzed. Cannaceae, Flacourtiaceae, Crisobalanaceae, Lauraceae, Fagaceae, Ulmaceae, Rosaceae, Asteraceae, Rubiaceae, Lauraceae and Caprifoliaceae were related with the Lepidoptera larvae, and an antimalaric effect has been reported in most of these families. In the orders Polydesmida, Opiliones and Blattodea, the extract from adults also had some important effect, probably because all of them fed on plants. Polydesmida and Opiliones have chemical substances that probably serve as defensive purposes; these chemicals could also have some antiparasitic effect. Therefore, the detection of antimalaric components in arthropod species led to the identification of plants with promissory antimalaric components. Rev. Biol. Trop. 56 (2): 473-485. Epub 2008 June 30.

Extractos alcohólicos, hexánicos y diclorometánicos de 751 muestras de artrópodos fueron estudiados por la presencia de actividad antimalárica. En este trabajo se empleó un modelo murino usando el Plasmodium berghei, modelo que es biológicamente similar a la malaria humana. El estudio fue realizado determinando el efecto del extracto sobre el parásito por la inclusión o no del colorante azul de cresil brillante. Estimando como positivos aquellos extractos cuya actividad antimalárica se mostró en concentraciones no mayores de 50 mg, se encontró que los órdenes más promisorios fueron Lepidoptera (24.1%), Polydesmida (81.3%), Blattodea (25%) y Opiliones, entre otros. Las formas inmaduras de Lepidoptera fueron las más positivas, por lo que se analizaron las plantas hospederos de donde se alimentaban dichos organismos. Las familias de estas plantas eran Malvaceae, Acanthaceae, Rutaceae, Myrtaceae, Solanaceae, Fabaceae, Urticaceae, Anacardiaceae, Rosaceae, Asteraceae, Rubiaceae, Lauraceae y Caprifoliaceae. Especies de casi todas estas familias han sido reportadas con actividad antimalárica. En el caso de los órdenes Polydesmida, Opiliones y Blattodea, cuyas formas adultas presentaron alguna actividad contra P. berghei, encontramos que todos esos grupos se alimentan también de plantas. En el caso de Opiliones sus especies son predadores de lepidópteros, coleópteros, hemípteros fitófagos y otros artrópodos, además de que producen sustancias de defensas tales como alcoholes, cetonas y quinonas, entre otros, todo lo cual podría explicar la actividad encontrada. Algunas especies del Orden Polydesmida, también secretan ciertas sustancias químicas, las cuales podrían tener un efecto antiparasitario. Así, a través de este trabajo en artrópodos hemos llegado a identificar fuentes vegetales potenciales para componentes antimaláricos.

Dissociation between vasodilation and Leishmania infection-enhancing effects of sand fly saliva and maxadilan

In this study, the ability of maxadilan and Lutzomyia longipalpis salivary gland lysate to enhance the infection of CBA mice by Leishmania major and of BALB/c mice by L. braziliensis was tested. No difference was observed between sizes of lesion in CBA mice infected with L. major and treated or not with salivary gland lysate or maxadilan, although they were injected in concentrations that induced cutaneous vasodilation. Although parasites were more frequently observed in foot pads and spleens of animals treated with maxadilan than in the animals treated with salivary gland lysate or saline, the differences were small and not statistically significant. The lesions in BALB/c mice infected with L. braziliensis and treated with maxadilan were slightly larger than in animals that received Leishmania alone. Such differences disappeared 14 weeks after infection, and were statistically significant only in one of two experiments

Preparation & standardization of the goat lung surfactant extract.

Exogenous goat lung surfactant extract (GLSE) was obtained by chloroform-methanol extraction of the centrifuged lung lavage. Four lungs provided around 250 mg of surfactant. GLSE has a phospholipid content of 50 percent, cholesterol of 1.5 percent and protein content under 1 percent. The preparation was bacteriologically sterile and had a shelf life of at least one month at 4 degrees C. Endotracheal administration of surfactant (50 mg/kg) in a rat lung model rendered surfactant deficient by saline lavage, restored the compliance characteristics to normal, thus documenting biological activity of the preparation. The cost of a course of 2 doses of surfactant replacement therapy was estimated to be as low as Rs 500/-. The study opens up the possibility of surfactant replacement therapy for the management of neonatal respiratory distress syndrome in India by an indigenous product at an affordable cost.

Bovine cementum extrac influences murine dental follicle cells in vitro

This study evaluated the attachment, chemo-attractive, proliferative and mineralization inductive potential of a bovine cementum extract (CPE) on newborn murine dental follicle cells (MDFC) in vitro. Cementum extract was partially purified by DEAE-cellulose chromatografy. A band representing and Mr of 55,000 was excised form the fel and the protein (s) were electroeluted. Attachment assays revealed that CPE (1.0 µg/ml) promoted MDFC attachment by 96 percent in comparison with collagen type I (5 µg/ml), and was five-fold greater compared with serum-free media (SFM), (p<0.05). Between 1 and 5 days CPE at 1.0 µg/ml and collagen type I at 5 µg/ml sustained more than 75 percent attachement and spreading of MDFC when compared to SFM (P<0.05). Contrary to other reports, fibronectin (0.5 µg/ml) was more potent than CPE in promoting MDFC chemoattraction (P<0.05). MDFC proliferation was stimulated by CPE (0.125 µg/ml), but this response was elicited only when CPE was used together with 10 percent FBS (37.3 percent) or 0.2 percent FBS (76 percent) (p<0.05). Alkaline phosphatase expression by MDFC was increased by CPE (1.0 µg/ml), in comparison to the control. Calcium deposits were detected by von Kossa staining in 14-day MDFC cultures treated with CPE. Nodule formation and its mineralization in long-term MDFC cultures were induced by CPE (1.0 µg/ml). Molecules(s) contained in CPE appear to regulate various biological activities in MDFC, indicating that CPE could play a key role in selecting progenitor cells required for the process of cementogenesis during development

Anti-inflammatory and analgesic activity of a water-soluble fraction from shark cartilage

The anti-inflammatory and analgesic activities of a water-soluble fraction (WSF), extracted with 0.1 M ammonium bicarbonate, pH 8.0, from shark cartilage were studied in several experimental mod-els. Orally administered WSF (1O mg/kg) caused 25.7 and 23.6 per cent inhibition of the paw edema produced in female Wistar rats (200-250 g) by carrageenan and dextran, respectively, after 3 h, as compared to controls. WSF administered orally had no effect on acetic acid-induced writhings in male Swiss mice (25-30 g) at the dose of 0.01 mg/kg, but caused 52.8 and 61.4 per cent inhibition at the doses of 0.1 and 0.5 mg/kg, respectively, compared to controls (No. of writhings/20 min, means ñ SEM: treated groups = 18.6 ñ 2.5, N = 12 and 15.2 ñ 1.4, N = 12, respectively; controls = 39.3 ñ 1.3, N = 77). In the formalin test (male Swiss mice, 25-30 g), orally administered WSF (0.5 and 1 mg/kg) caused 12.0 and 46.6 per cent inhibition of licking time, respectively, only in the 2nd phase (infiammatory) of the test (licking time, means ñ SEM: treated group = 18.3 ñ 4.4 sec, N = 7 and 11.1 ñ 3.4 sec, N = 13; controls = 20.8 ñ 2.4 sec, N = 44). The results suggest that a molecule of a protein nature in shark cartilage is probably responsible for the effects observed.

Antibacterial activity of the bryozoan Electra bellula (Hincks).

The antibacterial activity of the extracts of bryozoan E. bellula (Hincks) was tested against ten bacterial strains by antibiotic disc diffusion method. The maximum activity was observed against Proteus vulgaris, while Klebsiella pneumoniae and Shigella flexneri were insensitive to the bryozoan.

Action of plasma and liver extract from adult mice on the mitotic activity of young mouse liver

Se utilizaron ratones C3HS, endocriados, standardizados para análisis de periodicidad. Ciento setenta ratones de 25 ñ 2 días de edad fueron unyectados a las 16:00 horas con solución fisiológica, plasma o extracto de hígado de 27 machos de 90 días de edad. Los controles fueron realizados a las 08/16, 12/20, 16/24, 08/40, 12/44, 16/28, 08/64, 12/68 y 16/72 (hora día/hora post-inyección) y fue determinada la actividad mitótica de los hepatocitos y células litorales. La inyección de pequeñas dosis de extracto y plasma inhibe la actividad mitótica de los hepatocitos durante los dos primeros días de control. En el tercer día aparece una onda compensatoria. El extracto inhibe la actividad mitótica de las células litorales solo el primer día de control, mientras que el plasma inhibe esta variable el segundo y tercer día

The release of catecholamines by an endogenous factor that inhibits neuronal Na+, K(+)-ATPase

Se ha demostrado que la inhibición de la Na+, K+-ATPasa produce liberación de neurotransmisor en distintos modelos experimentales. En este laboratorio se observó previamente que una fracción soluble separada mediante Sephadex G-50 (pico II) es capaz de inhibir la actividad de Na+, K+-ATPasa pero no de otras enzimas asociadas a membranas. El objetivo del presente trabajo fue probar el efecto de la fracción pico II de cerebro sobre el contenido de neurotransmisor de las vesículas sinápticas de los nervios pineales. Se usaron ratas no inyectadas y ratas inyectadas 30 min antes con 5-hidroxidopamina (30 mg per Kg, i.p.). La 5-hidroxidopamina produce un falso neurotransmisor cuya presencia en las vesículas sinápticas se visualiza luego de la fijación con glutaraldehído-osmio como un material electrón denso que llena total o parcialmente las vesículas. En ratas no inyectadas se estudió la osmiofilia y la reacción cromafín del nucleoide electron denso. Las glándulas pineales se incubaron en solución Tyrode sin calcio en presencia y ausencia de pico II a temperatura ambiente y se estudiaron al microscopio electrónico. Cuando las glándulas de las ratas pretratadas con 5-hidroxidopamina se incubaron con pico II se observó una disminución siginificativa en el número de vesículas totalmente llenas de material electrón denso. Esto indica una reducción en el contenido de falso neurotransmisor contenido en la matriz de las vesículas sinápticas. Este efecto sobre las vesículas sinápticas no se observó en presencia de pico II invejecido, que no inhibe la Na+, K+-ATPasa. Cuando las gládulas de ratas no inyectadas se incubaron con pico II no se observaron cambios ni en la osmiofilia ni en la reacción cromafin de las vesículas sinápticas. La osmiofilia y la reacción cromafin del nucleoide electrón denso marca el sitio de acumulación de monoaminas (catecol e indolaminas en los nervios pineales). Estos resultados son coherentes con la idea de una relación entre la inhibición de la actividad de Na+, K+-ATPasa y la liberación de una fracción de neurotransmisor acumulado en los terminales nerviosos

Reproducción inducida de la cachama, Colossoma macropumum con extracto hipofisiario y un análogo de la hormona de la gonodotropinas (LHRH-A) / Induced reproduction of the cachama, Colossoma macropomum with hypophysial extract (EH) and with an analog og gonadotropin hormone releasing hormone (LHRH-A)

Hembras adultas de cachama C. macropomum en la etapa de desove, fueron inyectadas intraperitonealmente con 5 mg/Kg de peso corporal de extracto hipofisiario (EH) de cachama obtenido de ejemplares adultos capturados en el príodo de predesove sólo o en combinación con un análogo de la hormona liberadora de la hormona luteinizante ([desGLI10D-Ala6] LHRH etilamida) (LHRH-A) (50 *g/kg de peso corporal), administrada 12 horas después de la administración de EH. La administración de EH produjo el desove en 2 de los 5 animales tratados. Una inyección de EH seguida 12 horas más tarde de LHRH-A causó un 60%de desove. La calidad de los huevos fué mejor en los animales inyectados con EH que en los tratados con la combinación de EH+LHRH-A

Effect of LH, FSH, LH + FSH and homoplastic pituitary extract on developing testis and epididymis of pigeon Columba livia.

Ovine LH is needed for differentiation of juvenile Leydig cells and for their maintenance and steroidogenic potential, while FSH is necessary for Sertoli cell activity and spermatogonial multiplication suggesting that LH is steroidogenic hormone and FSH is gametogenic in the developing pigeon, C. livia. Homoplastic pituitary extract is more potent than ovine LH + FSH in stimulating gametogenic and endocrine components of the developing testis.

Antigonadotropic activity of pineal gland of the Indian palm squirrel Funambulus pennanti.

Bioassay of the pineal extract of F. pennanti was performed in immature female mice which was previously sensitized with human chorionic gonadotrophin. Reduction of ovarian and uterine weights indicated an antigonadotropic nature of the pineal gland of this animal.

Efecto de monoaminas sobre la secreción de ACTH en células dispersas, perfundidas, de la adenohipófisis del pato barcinochico (anasflavirostris) / Effect of monoamines on ACTH secretion by dispersed, perfused cells from the adenohypophysis of the barcino chico duck (Anas flavirostris)

Continuando con la caracterización de los factores que intervienen en el control de la secreción de ACTH por parte de las células corticomelanotropas de la hipófisis de las aves, hemos probado, utilizando un modelo in vitro de perfusión continua de células adenohipofisarias de pato, el efecto sobre la liberación de ACTH de diversas aminas biógenas y neurofármacos: noradrenalina (NA), adrenalina (A), dopamina (DA), serotonina (5-HT), fenilefrina (Phe), e isoproterenol (IP). Las respuestas obtenidas se comparon con las ejercidas por extractos de eminencia media de hipotálamo de pato (EMP). El orden de "actividad intrínseca (Vmáx) fue: NA+A>Phe>DA=5-HT. Las sustancias fueron probadas en un rango de dosis de 10**-4 a 10**-9M. Todas las sustancias ensayadas resultaron ser agonistas parciales respecto del efecto de EMP. La actividad intrínseca de los más potentes agonistas ensayados, NA y A,fue de 0,66 respecto de la alcanzada por EMP. Se concluye que en el pato, las células corticomelanotropas segregan ACTH en respuesta a NA y A en dosis compatibles con un papel fisiológico de las mencionadas catecolaminas, lo que hace presumir que estas sustancias pueden naturalmente controlar la secreción de ACTH en las aves por acción directa sobre la hipófisis. 5-HT y DA se comportaron como agonistas muy débiles sobre la liberación de ACTH por las células CM del pato en el sistema empleado

Development of the effect of an indifferentiated tumour extract on sinusoid littoral cells of young growing liver

El extracto de un tumor indiferenciado de crecimiento rápido, inyectado a las 1600/00 horas (hora del día/horas postinyección) inhibe la actividad mitótica de las células litorales del hígado joven en crecimiento durante el período circadiano dle día siguiente. El extracto inhibe también el aumento en el número de células litorales (SLOC/1000 cells) que sólo alcanza los valores de los animales inyectados con solución fisiológica, 12 horas después, a las 0200/30 horas. En los días subsiguientes la actividad mitótica a las 1400/46, 1400/70 y 1400/94 horas, no muestra ningún cambio. Los valores del número de células litorales por 1000 células son significativamente menores en ratones inyectados con extracto a las 1400/46, 1400/70 y 1400/94 horas. La inyección del extracto a las 0700/00 horas no muestra ningún efecto cuando el control de la actividad mitótica se hace a las 1400/07 horas. El efecto sobre la actividad mitótica se explicaría por la acción del extracto en la última parte de G1 o en G1-S (o en ambas). En cuanto al efecto sobre el número de células litorales por 1000 células podría deberse a una acción sobre el comportamiento migratorio de los monocitos, que aparecerían en el hígado como células de Kupffer o sobre producción en médula ósea (o en ambos efectos)